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6-28
1冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附...
6-15
標準菌株是屬于種屬鑒定的規范參照菌，而質控菌株，往往是從功能或用途上講的，通常是以標準菌株用來做質控的。標準菌株使用注意事項：1、選擇合適的培養基：勿使用選擇性培養基。一般使用非選擇性的增菌培養基，因為微生物在選擇性培養基中生長某些生物特性可能丟失，保藏的菌種的生物特性可能與標準菌株特性不同。2、菌液的濃度：菌液的濃度一般越大，菌種保存時間越長。保藏時細菌常使用菌液，霉菌常用無菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。3、甘油濃度：甘油終濃度一般為10%~20%。由于甘油原液太粘稠，需...
6-15
菌種是從事微生物學及生命科學研究的基本材料，在醫學領域中，診斷制品的制備，菌苗的生產、微生物致病性研究。1、梭氏法將容有1滴細胞懸液的小管﹐置于盛有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大試管中﹐用真空泵抽至1、3帕時﹐將大試管密封保存。這是為減少細胞死亡率而采取的一種不經凍結﹑緩慢脫水的干燥保藏法﹐適用于多種細菌﹑真菌。2、冷凍真空干燥法將細胞懸液每0、1~0、2毫升注入一無菌安瓿瓶﹐于-40℃預凍1小時﹐再于-20~30℃﹑真空度為13、3帕的條件下脫水。在脫水過程后期﹐安瓿瓶外溫...
4-20
所有體外培養細胞，包括初代培養及各種細胞系，當生長達到一定密度后，都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養液的性質、接種細胞數量和細胞增殖速度等有關。接種細胞數量大、細胞基數大、相同增殖速度條件下，細胞數量增加與飽和速度相對要快（實際上細胞接種數量大時細胞增殖速度比稀少時要快）。連續細胞系和腫瘤細胞系比初代培養細胞增殖快，培養液中血清含量多時細胞增殖比少時快。以上情況都會縮短傳代時間。所謂細胞“一代”一詞，系僅指從細胞接種到分離再培養時的一段時間，這已成為培養工作中的一種習慣說...
4-11
細胞株和細胞系的區別，列表說明我來答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細胞株和細胞系的區別：一、概念不同1、細胞株：細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株（CellStrain）。2、細胞系：細胞系（cellline）指原代細胞培養物經*傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。二、形成方法不同1、細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物成為細胞株。...
4-7
細胞在體外進行培養時影響生長的幾點因素細胞在體外進行培養,失去了機體的調節和控制,因此,除滿足營養的要求外,還必須使細胞生存環境晝接近活體的環境.外環境的培養條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細胞的生長.一、溫度：一般哺乳類及禽類細胞體外培養的適宜溫度是37~38℃.溫度過高或過低都會影響到細胞的生長.細胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強,在低溫下,細胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時,雖影響細胞代謝,但并無傷害作用.把細胞置于23~25℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減...
3-19
什么時候需要穩定細胞株？以下實驗，構建穩定細胞株而不是瞬時轉染更能滿足實驗要求：1)外源片段在分裂細胞中長期(2周)穩定表達。雖然普通轉染實驗一般只能保證2-4天的轉染和表達效率，但腺病毒載體在多數分裂細胞中可以維持2-4周內的高轉染效率和表達周期。而非分裂細胞，可以使用腺相關病毒載體轉導外源基因，因為腺相關病毒載體在許多非分裂細胞中可以保持長達1年的高效表達。2)需要構建使用誘導表達系統，這主要是由于：a)過表達基因或者干擾目的基因引起細胞毒性或者抑制細胞生長等不利因素;b...
3-18
細胞培養注意事項（入門級）總的原則：無菌操作、保證細胞培養環境的穩定性按時間順序整理1、細胞房和生物安全柜（或超凈工作臺）先開紫外照射30min。作用：對環境滅菌（空氣）。（備注：如果著急，至少也要開15分鐘）在做實驗之前考慮好需要哪些物品。開始照射之前，將所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超凈工作臺）里面。常用移液槍或電動移液器等，需要在工作臺上放置一套設備。細胞培養箱一般都已經調整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時更換。2、顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意：顯微...
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